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人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)檢測試劑盒

“人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)檢測試劑盒",現(xiàn)貨供應(yīng),*,質(zhì)量保證。中英文雙版說明書,提供實驗代測服務(wù)。

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  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-10-07
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詳細(xì)介紹

所有產(chǎn)品僅供科研使用,不能用于食用和醫(yī)療等

 

人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)檢測試劑盒實驗中的顯色和比色 
(1) 顯色 
顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行,時間一般不需要嚴(yán)格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時間,及時判斷。
OPD底物顯色一般在室外溫或37反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,再延長反應(yīng)時間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行,顯色反應(yīng)結(jié)束時加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。 TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實驗結(jié)果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當(dāng)時間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達(dá),隨即逐漸減弱,至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時間(12-24小時不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。
人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)檢測試劑盒(2) 比色 
比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗,需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。在加底物液顯色前,先將軟板邊緣剪凈,這樣,此板就可*平妥坐入座架中。比色時應(yīng)先以蒸餾水校零點,測讀底物孔未經(jīng)任何反應(yīng)僅加底物液的孔和空白孔以生理鹽水或稀釋液代替標(biāo)本作全過程的孔,以記錄本次試驗的試劑狀況。其后可用空白孔以蒸餾水校零點,以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度,然后進(jìn)行計算。比色結(jié)果的表達(dá)以往通用光密度(oplical densityOD),現(xiàn)按規(guī)定用吸光度(absorbenceA),兩者含義相同。通常的表示方法是,將吸收波長寫于A字母的右下角,如OPD的吸收波長為492nm,表示方法為"A492nm""OD492nm"
(3) 酶標(biāo)比色儀 
酶標(biāo)比色儀簡稱酶標(biāo)儀,通常指于測讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有:測讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001,準(zhǔn)確性為±1%,重復(fù)性達(dá)0.5%。舉例說,若某孔測得的A值為1.083,則該孔相對于空氣的真實A值應(yīng)為1.083±0.01(1.073~1.093),重復(fù)測定數(shù)次,其A值均應(yīng)1.083±0.05(1.078~1.088)在之間。酶標(biāo)儀的可測范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000,新型號的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*""over"或其它符號表示。應(yīng)注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標(biāo)儀的可測范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時應(yīng)予注意。 酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽光或強(qiáng)光照射下,操作時室溫宜在15~30,使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘,測讀結(jié)果更穩(wěn)定。測讀A值時,要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,如OPD492nm波長。有的酶標(biāo)儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動ELISA板的位置。例如OPD492nmW1630nmW2,zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標(biāo)儀性能有所不同,使用中應(yīng)詳細(xì)新聞記者說明書。

     本公司專業(yè)經(jīng)銷眾多科研領(lǐng)域的ELISA試劑盒,生物試劑,抗體,培養(yǎng)基,血清。為中國科研試劑供應(yīng)商之一,質(zhì)量被全國各大院校科研機(jī)構(gòu)認(rèn)可,并為Elisa試劑盒長期供應(yīng)商,作為戰(zhàn)略合作伙伴。歡迎您"產(chǎn)品詳細(xì)信息。

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